Guide complet sur Legionella pneumophila : seuils reglementaires, risques sanitaires, methodes d'analyse et actions correctives. Reference conforme a l'arrete du 1er fevrier 2010.
Legionella pneumophila est une bacterie a Gram negatif naturellement presente dans les eaux douces. Elle prolifere dans les reseaux d'eau chaude sanitaire (ECS) entre 25 et 45 degres C et se transmet a l'homme par inhalation d'aerosols contamines. Elle est l'agent responsable de la legionellose, une pneumonie atypique grave avec un taux de mortalite de 10 a 15% des cas declares.
Les legionelles sont un genre bacterien comprenant plus de 60 especes, dont Legionella pneumophila est la plus pathogene pour l'homme. Cette bacterie a ete identifiee pour la premiere fois en 1976 a la suite d'une epidemie de pneumonie lors d'un congres de la Legion americaine a Philadelphie, d'ou son nom.
Legionella pneumophila se developpe naturellement dans les milieux aquatiques (lacs, rivieres, sols humides) a des concentrations generalement faibles et sans danger. Le probleme survient lorsque ces bacteries colonisent les reseaux d'eau artificiels ou les conditions sont favorables a leur multiplication : temperature comprise entre 25 et 45 degres C, stagnation de l'eau, presence de biofilm et de nutriments.
La transmission a l'homme se fait exclusivement par voie respiratoire, par inhalation de micro-gouttelettes d'eau contaminee (aerosols). Il n'existe pas de transmission interhumaine ni de risque par ingestion d'eau contaminee. Les installations a risque sont principalement les reseaux d'eau chaude sanitaire (douches), les tours aerorefrigerantes, les bains a remous (spas, jacuzzis), les brumisateurs et les fontaines decoratives.
Les seuils ci-dessous sont definis par l'arrete du 1er fevrier 2010 relatif a la surveillance des legionelles dans les installations de production, de stockage et de distribution d'eau chaude sanitaire. Ils s'appliquent a Legionella pneumophila et determinent les actions a mettre en oeuvre.
| Concentration | Niveau | Actions requises |
|---|---|---|
| < 250 UFC/L | Conforme | Aucune action requise. Maintenir la surveillance periodique selon le carnet sanitaire. Resultat satisfaisant. |
| 250 - 1 000 UFC/L | Vigilance | Renforcer la surveillance. Verifier la temperature du reseau aux points eloignes (> 50 degres C en tout point). Controler le bon fonctionnement des mitigeurs. |
| 1 000 - 10 000 UFC/L | Action | Actions correctives obligatoires : choc thermique a 70 degres C pendant 30 minutes, purge des bras morts, verification des mitigeurs. Recontrole sous 2 a 4 semaines. |
| > 10 000 UFC/L | Urgence | Restriction d'usage immediate : interdiction de douche et de tout usage generant des aerosols. Desinfection curative obligatoire. Declaration a l'ARS. Recontrole apres traitement. |
| > 100 000 UFC/L | Fermeture | Fermeture de l'installation. Declaration obligatoire a l'ARS dans les 24 heures. Investigation sanitaire. Desinfection complete du reseau avant remise en service. |
Source : Arrete du 1er fevrier 2010 relatif a la surveillance des legionelles dans les installations de production, de stockage et de distribution d'eau chaude sanitaire. Journal officiel de la Republique francaise.
La legionellose est une maladie a declaration obligatoire en France depuis 1987. Chaque cas diagnostique doit etre signale a l'ARS (Agence Regionale de Sante) dans les 24 heures par le medecin ou le laboratoire.
L'infection par Legionella pneumophila peut se manifester sous deux formes cliniques distinctes :
Les personnes les plus vulnerables sont les personnes agees (plus de 65 ans), les immunodeprimes (traitements immunosuppresseurs, chimiotherapie), les fumeurs, les diabetiques et les personnes atteintes de maladies respiratoires chroniques. L'incubation dure de 2 a 10 jours apres l'exposition.
En France, environ 1 800 a 2 000 cas sont declares chaque annee, avec un pic saisonnier entre juin et octobre. Le taux de mortalite global est d'environ 10%, mais peut atteindre 30% dans les populations a risque ou en cas de prise en charge tardive.
La methode de reference pour la recherche de Legionella pneumophila dans les eaux est la culture sur milieu GVPC (Glycine Vancomycine Polymyxine Cycloheximide) selon la norme NF T90-431. Cette methode est la seule reconnue par la reglementation francaise pour la surveillance des ECS.
L'echantillon est preleve au point le plus eloigne du systeme de production d'eau chaude, sans flamber le bec ni purger. Un volume minimum de 1 litre est preleve dans un flacon sterile contenant du thiosulfate de sodium pour neutraliser le chlore residuel. La temperature de l'eau est mesuree au point de prelevement.
Au laboratoire, l'echantillon est concentre par filtration sur membrane (0,45 micron) puis la membrane est deposee sur un milieu de culture selectif GVPC. Un traitement thermique (50 degres C pendant 30 minutes) ou acide est applique pour eliminer la flore interferencielle.
Les boites de Petri sont incubees a 36 degres C (+/- 1 degres C) pendant un minimum de 10 jours. Une lecture intermediaire est realisee entre 3 et 5 jours pour detecter les contaminations massives. Les colonies suspectes sont repiquees pour confirmation.
Les colonies presomptives sont confirmees par repiquage sur milieu BCYE (avec et sans L-cysteine). L'identification de l'espece et du serogroupe est realisee par agglutination au latex. Les resultats sont exprimes en UFC/L (unites formant colonies par litre).
| Methode | Norme | Delai | Statut reglementaire |
|---|---|---|---|
| Culture sur GVPC | NF T90-431 | 10-14 jours | Methode de reference |
| PCR quantitative (qPCR) | NF T90-471 | 24-48 heures | Methode alternative |
En cas de depassement du seuil de 1 000 UFC/L de Legionella pneumophila, des actions correctives doivent etre mises en oeuvre dans les meilleurs delais. La nature et l'urgence des actions dependent du niveau de contamination constate.
La surveillance de la legionelle dans les reseaux d'eau chaude sanitaire est encadree par plusieurs textes reglementaires francais et europeens :
Laboratoire accredite COFRAC. Analyse par culture selon NF T90-431. Kit de prelevement inclus.